徠卡顯微鏡神經(jīng)學的應用

 徠卡顯微鏡神經(jīng)學的應用

與急性切片的準備工作

作為一個嚴格的監(jiān)管，高度復雜的細胞網(wǎng)絡的神經(jīng)系統(tǒng)。除了獲得知識網(wǎng)絡的單個單元，神經(jīng)元細胞，了解，作為一個整體的網(wǎng)絡是非常重要的，完成的圖片神經(jīng)元溝通。為研究神經(jīng)元網(wǎng)絡活動的方法之一是使用厚的片制劑（約300微米）的神經(jīng)組織，因為大多數(shù)的研究軸突切片內(nèi)的細胞之間的連接保持在這樣的保守的準備工作。

方便切片的制備與徠卡體視顯微鏡

急性切片進行活細胞成像和/或膜片鉗編制是一個非常耗時的過程。與細膩的組織切片工作需要極大的耐心，經(jīng)驗和柔和處理的樣品，以避免干擾的神經(jīng)網(wǎng)絡振動或其他物理壓力。在籌備過程中一個可靠，精確和方便使用的儀器以優(yōu)異的光學，像徠卡立體顯微鏡，有助于*大限度地減少應力，試樣和實驗者。

在實驗過程中避免震動

避免生理上的壓力繼續(xù)一次切片的標本已經(jīng)轉(zhuǎn)移到實際的膜片鉗設(shè)置。這里，顯微鏡的任何操作（例如，改變物鏡，使用滑塊，聚焦等）可以擾亂軸突內(nèi)的切片或所獲取的膜片鉗配置的連接。

徠卡DM6000 FS固定臺顯微鏡是專為片準備工作。由于它的智能機動化，它可以讓所有的顯微鏡功能，對比的方法來改變放大倍率之間切換，操作沒有觸摸顯微鏡，導致無振動實驗傳導。

智能自動化節(jié)省時間和資源

因此，優(yōu)化的自動化概念保存樣品從意外中斷，從而節(jié)省時間和資源。由于所有的載流元件被關(guān)閉，如果不使用，徠卡DM6000 FS提供*高的電子穩(wěn)定演唱會與***的光學和機械穩(wěn)定性。結(jié)合徠卡IRAPO HCX25X，0.95 nA水浸物鏡，這使得放大倍率轉(zhuǎn)換器使用，而不是改變物鏡，徠卡DM6000 FS固定臺顯微鏡，膜片鉗和活細胞成像的*佳選擇片的準備。

1.綠色熒光蛋白標記的嗅感覺神經(jīng)元的鼠標主要嗅覺上皮細胞在急性片（微分干涉對比）。圖片由daniela Flügge 博士，亞琛工業(yè)大學亞琛大學，德國。

2.徠卡DM6000 Fs的固定臺顯微鏡是一個完全自動化的高端研究儀器適用于*的成像實驗，除了電工作。憑借其智能的自動化概念，在顯微鏡的所有操作（例如，物鏡/變倍，聚焦，對比的方法之間切換）正在進行的實驗過程中進行，而不會造成任何振動。由于所有的載流徠卡DM6000 Fs的元素和電動機被關(guān)斷，如果在不使用，固定舞臺顯微鏡有助于消除電氣噪聲的膜片鉗安裝。

3.徠卡HCX IRAPO I 25x/0.95 W的高水浸物鏡是特別設(shè)計用于電的應用程序和近紅外DIC。它結(jié)合了一個相對低放大倍數(shù)（25倍），具有高數(shù)值孔徑（0.95），它允許使用沒有得到空放大的倍率換。因此，物鏡幾乎已經(jīng)過時了。此外，物鏡上有一個非常陡峭的角度（41°）一個很長的自由工作距離（2.5毫米），以確保方便地訪問的移液管到樣品中。

4.鈣染料型Fluo-4負載細胞在急性小鼠主片的共焦圖象嗅上皮活細胞成像用Leica DM6000 CFS固定階段收購顯微鏡。圖片由daniela Flügge 博士，德國亞琛工業(yè)大學。

1.相差與星形膠質(zhì)細胞的共培養(yǎng)的海馬神經(jīng)元中的對比度的圖像?！把a丁-移液管連接到準備用于記錄的細胞。圖片由 Ainhara Aguado博士，德國波鴻魯爾大學。

2.徠卡倒置顯微鏡DMI系列是**的工具來執(zhí)行養(yǎng)殖或其他貼壁細胞的電生理和活細胞成像。有了模型從非機動車全電動版本，所有的需求都包括在內(nèi)。

結(jié)合設(shè)備像徠卡快的濾光輪，量身定制的孵化室，機動階段，用戶友好，功能**的LAS AF軟件，你可以建立補丁夾緊和/或成像設(shè)置，完全滿足您的要求。

3.徠卡快速外部濾光輪的波長進行快速無振動的變化在24毫秒之內(nèi)（相鄰位置），使他們的*快的濾光輪市場。四濾光輪，可同時與5個可自由定義的位置激發(fā)和*大的靈活性的排放側(cè)和一個偉大的上不同的應用程序的數(shù)量。由于我們的成像設(shè)備（如攝像機，過濾器通過LAS AF輪轂，百葉窗）時性操作的特殊的音序器電路板軟件，只需點擊幾下鼠標，我們提供*高的成像速度。

4.GFP標記的嗅感覺神經(jīng)元的急性分離。圖片來源：Jennifer spehr博士，德國亞琛工業(yè)大學。  

徠卡顯微鏡神經(jīng)學的應用

貼壁培養(yǎng)或游離細胞工作

膜片鉗或活細胞成像的貼壁細胞主要有兩個原因：一是為了獲得一個特定的培養(yǎng)或新鮮分離的細胞類型的細胞生理信息，另一種是內(nèi)獲取信息的特定分子的行為一個生理過程，例如離子通道的信號級聯(lián)。對于*個，感興趣的身體是培養(yǎng)或解離的細胞本身。對于后者，該信元類型起的作用不大，作為重點是在特定的生理過程中可能發(fā)生的各種細胞中，或可能被模仿在一個易于培養(yǎng)商業(yè)的感興趣的基因的轉(zhuǎn)染細胞系。

培養(yǎng)或游離細胞是**的樣本進行活細胞成像

培養(yǎng)（或分離的）貼壁細胞生理研究的一個優(yōu)勢是，這些細胞通常存在于單細胞層和方便灌注的物質(zhì)（如酶抑制劑或激活的離子通道）。此外，這些標本產(chǎn)生的雜散光與熒光激發(fā)光，從而縮短曝光時間。這節(jié)省了從光漂白的和有害的照射，這是有利的兩個高速成像和長期活細胞成像實驗樣品。

*適合活細胞倒置顯微鏡工作

大多保持在培養(yǎng)皿培養(yǎng)或游離細胞。這意味著，倒置顯微鏡可以用來進行活細胞成像或膜片鉗實驗。方便工作與培養(yǎng)皿倒置顯微鏡和周圍的樣品，提供了很大的空間，足夠的的多種微量移液器，吸，灌注針頭及其他設(shè)備的位置。

此外，細胞膜片鉗移液器執(zhí)行電生理實驗很容易訪問的。

設(shè)計您的顯微鏡設(shè)置

徠卡顯微系統(tǒng)提供一個完全自動化的版本等高端應用相結(jié)合的補丁夾緊范圍從非電動的版本為常規(guī)應用（徠卡DMI3000 B），通過*的應用程序的完全編碼和部分電動顯微鏡（LEICA DMI4000 B）倒置顯微鏡和高速多通道活細胞成像（徠卡DMI6000 B）。

外圍設(shè)備，如*高速外部濾波器輪（波長切換，在不到24毫秒）和量身定制的氣候室，使您的活細胞成像顯微鏡的*研究了高端的設(shè)置。