光學(xué)顯微鏡的成像原理
光學(xué)顯微鏡是一種利用光學(xué)透鏡產(chǎn)生影像放大效應(yīng)的顯微鏡。
由物體入射的光被至少兩個(gè)光學(xué)系統(tǒng)（物鏡和目鏡）放大。首先物鏡產(chǎn)生一個(gè)被放大實(shí)像，人眼通過作用相當(dāng)于放大鏡的目鏡觀察這個(gè)已經(jīng)被放大了的實(shí)像。一般的光學(xué)顯微鏡有多個(gè)可以替換的物鏡，這樣觀察者可以按需要更換放大倍數(shù)。這些物鏡一般被安置在一個(gè)可以轉(zhuǎn)動(dòng)的物鏡盤上，轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡盤就可以使不同的目鏡方便地進(jìn)入光路，物鏡盤的英文是Nosepiece，又譯作鼻輪。
十八世紀(jì)，光學(xué)顯微鏡的放大倍率已經(jīng)提高到了1000倍，使人們能用眼睛看清微生物體的形態(tài)、大小和一些內(nèi)部結(jié)構(gòu)。直到物理學(xué)家發(fā)現(xiàn)了放大倍率與分辨率之間的規(guī)律，人們才知道光學(xué)顯微鏡的分辨率是有極限的，分辨率的這一極限限制了放大倍率的無(wú)限提高，1600倍成了光學(xué)顯微鏡放大倍率的*高極限，使得形態(tài)學(xué)的應(yīng)用在許多領(lǐng)域受到了很大限制。
光學(xué)顯微鏡的分辨率受到光波長(zhǎng)的限制，一般不*過0.3微米。假如顯微鏡使用紫外線作為光源或物體被放在油中的話，分辨率還可以得到提高。
光學(xué)顯微鏡依樣品的不同可分為反射式和透射式。反射顯微鏡的物體一般是不透明的，光從上面照在物體上，被物體反射的光進(jìn)入顯微鏡。這種顯微鏡經(jīng)常被用來(lái)觀察固體等，多應(yīng)用在工學(xué)、材料領(lǐng)域，在正立顯微鏡中，此類顯微鏡又稱作金相顯微鏡。透射顯微鏡的物體是透明的或非常薄，光從可透過它進(jìn)入顯微鏡。這種顯微鏡常被用來(lái)觀察生物組織。
光學(xué)顯微鏡依其聚光鏡(condenser)和物鏡(Objective)的設(shè)計(jì)，可用來(lái)觀察不同的樣品。明視野(Brightfield)用來(lái)觀察薄的染色生物組織樣品，暗視野(Darkfield)功能的視野下，背景為黑色，能突顯樣品的細(xì)微面貌，觀察未染色樣品時(shí)，如活細(xì)胞，可利用相位差(Phase)功能。另外還有微分干涉差(differential interference contrast，DIC)功能，都常搭配在光學(xué)顯微鏡上。
依光源的不同，還有螢光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等類別。
顯微鏡成像原理
現(xiàn)在的光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造非常的復(fù)雜精密，為了精準(zhǔn)成像，顯微鏡的光學(xué)路徑必須嚴(yán)謹(jǐn)?shù)脑O(shè)計(jì)與控制。盡管如此，光學(xué)顯微鏡的運(yùn)作原理是非常簡(jiǎn)單的。
*簡(jiǎn)單的物鏡是由高分辨率的玻璃鏡制成，有非常短的焦距，大概是160 mm左右，而產(chǎn)生了放大倒立成像，因此像是非常靠近試片來(lái)觀察，經(jīng)由對(duì)焦，其產(chǎn)生的是實(shí)像，不用經(jīng)由目鏡即可用肉眼看到，或者成像于紙張上。在多數(shù)的顯微鏡，目鏡是雙鏡組成的，一個(gè)在眼睛，產(chǎn)生虛像，使肉眼看到放大成像；一個(gè)則靠近物鏡，產(chǎn)生實(shí)像。
倒立顯微鏡
倒立顯微鏡是顯微鏡的一種，在穿透光觀察下，明視野用之照明光源和聚光鏡是來(lái)自機(jī)身上方，光線穿過聚光鏡到達(dá)樣品，再穿過位于樣品下方的物鏡，然后借由反射鏡和透鏡到達(dá)觀察者的眼睛或成像儀器。對(duì)螢光顯微鏡而言,螢光激發(fā)光源和物鏡同位于底部。由于激發(fā)光源可以是高功率大型雷射光源或弧光燈,倒立式的設(shè)計(jì)更能穩(wěn)定顯微鏡鏡的結(jié)構(gòu)。倒立顯微鏡常用于觀察培養(yǎng)中的細(xì)胞或組織，特別是應(yīng)用在螢光的生物樣品上。
解剖顯微鏡
解剖顯微鏡，又被稱為實(shí)體顯微鏡或立體顯微鏡，是為了不同的工作需求所設(shè)計(jì)的顯微鏡。利用解剖顯微鏡觀察時(shí)，進(jìn)入兩眼的光各來(lái)自一個(gè)獨(dú)立的路徑，這兩個(gè)光路徑夾了一個(gè)小小的角度，因此在觀察時(shí)，樣品可以呈現(xiàn)立體的樣貌。解剖顯微鏡的光路設(shè)計(jì)有兩種：The Greenough Concept和The Telescope Concept。
解剖顯微鏡常常用在一些固體樣本的表面觀察，或是解剖、鐘表制作和小電路板檢查等工作上。
分類
正立顯微鏡
正立顯微鏡是光學(xué)顯微鏡的一種，在穿透光觀察下，光源由機(jī)身下面經(jīng)過聚光鏡到達(dá)樣品，再穿過位于樣品上方的物鏡，然后借由反射鏡和透鏡到達(dá)觀察者的眼睛或其他成像儀器。正立顯微鏡物鏡和聚光鏡中間的空間較小，適用于正立顯微鏡觀察的物品，通常較薄，可夾于玻片中。正立顯微鏡的優(yōu)點(diǎn)是結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，因此一般顯微鏡多屬此類。
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