尼康顯微鏡雙頻激發(fā)塊FITC-Texas Red
尼康顯微鏡雙頻激發(fā)塊FITC-Texas Red
紫外線和尼康FITC-Texas Red濾光片組合可見光透射光譜曲線下面示于圖1.該過濾器組被設(shè)計(jì)用于將信號從異硫氰酸熒光素（FITC）和Texas Red在雙標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中的探針*佳檢測，并采用激發(fā)濾光器與窄帶通窗口在藍(lán)色（490-505nm），綠色（560-580nm）光譜區(qū)。 并入到單個元件中的雙發(fā)射（阻擋）激發(fā)塊的通帶允許同時從兩個熒光檢測的綠色和紅色發(fā)光。具有選擇為互補(bǔ)的發(fā)射和激發(fā)波長的兩個帶通透射區(qū)域（多色）一個二色鏡的透射和反射帶的每一個過濾器，和應(yīng)用程序之間的尖銳過渡，允許雙波段信號檢測以*小的干擾。
雙激發(fā)激發(fā)塊模塊FITC-Texas Red規(guī)格：
激發(fā)波長篩選：490-505nm（帶通，498 CWL）和560-580nm（帶通，570 CWL）
多色鏡波長：510-555nm（帶通）和585-665nm（帶通）
屏障過濾波長：515-545nm（帶通，530 CWL）和600-650nm（帶通，625 CWL）
在FITC-Texas Red雙激發(fā)帶的熒光濾光器組合是用于同時檢測的熒光染料FITC-Texas Red與帶之間的*小串?dāng)_的專門設(shè)計(jì)的，并且可以與其他對具有相似光譜分布的熒光探針的使用。過濾器設(shè)置的較短波長信道將選擇狹義的光譜區(qū)域?yàn)樗{(lán)色激發(fā)和綠色發(fā)光檢測，而較長的波長成分對應(yīng)綠色激發(fā)和紅光發(fā)射檢測。 研究以下熒光團(tuán)的各種組合時FITC-Texas Red激發(fā)塊組建議：FITC，綠色熒光蛋白（GFP），的Cy2，BODIPY FL，Oregon Green，或的Alexa Fluor 488（藍(lán)色激發(fā)），配對Texas Red或Alexa Fluor 594（綠色激發(fā)）。 在圖2中呈現(xiàn)的圖像表明具有多種針對不同細(xì)胞內(nèi)位置的熒光探針對這個激發(fā)塊組合的性能。
示于圖2（a）是從的Madin-Darby犬腎（MDCK線）染色的細(xì)胞與MitoTracker紅CMXRos和Alexa Fluor 488鬼筆環(huán)肽，其靶向細(xì)胞內(nèi)的線粒體的網(wǎng)絡(luò)和細(xì)胞骨架的肌動蛋白絲，分別培養(yǎng)的熒光發(fā)射。 *大吸收MitoTracker RED CMXRos的是579nm，并且*大發(fā)射發(fā)生在599nm，而為的Alexa Fluor 488中的相應(yīng)值是498和519nm。 另外，將試樣同時用DAPI染色（在細(xì)胞核靶向DNA;藍(lán)色發(fā)光）。 注意沒有來自藍(lán)色（DAPI）熒光信號，但明亮的橙紅色熒光被管狀線粒體，并從在細(xì)胞質(zhì)肌動蛋白絲的綠色發(fā)射表現(xiàn)。
綿羊表皮皮膚組織的一個薄的部分染色DNA和糖蛋白與SYTOX Orange和Oregon Green488麥胚凝集素，分別示于圖2（b）。 *大吸收SYTOX橙是547nm，并且*大發(fā)射發(fā)生在570nm，而對于Oregon Green488中的相應(yīng)值是496和524nm。 另外，將試樣同時染色的Alexa Fluor 350綴合至鬼筆環(huán)肽（靶向肌動蛋白網(wǎng)絡(luò);藍(lán)色發(fā)光）。 注意沒有信號從藍(lán)色（的Alexa Fluor 350）的熒光團(tuán)，但明亮的橙紅色熒光由核和從毛囊的細(xì)胞質(zhì)和膜元件的糖蛋白的綠色發(fā)射表現(xiàn)。（奧林巴斯顯微鏡）
在印度麂的鹿皮沾上的Alexa Fluor 568綴合的鬼筆環(huán)肽和LysoTracker綠DND-26成纖維細(xì)胞，其靶向細(xì)胞內(nèi)的肌動蛋白和溶酶體的培養(yǎng)熒光發(fā)射，分別被顯示在圖2的（c）。 *大吸收的Alexa Fluor 568的是578nm，并且*大發(fā)射發(fā)生在603nm，而對于LysoTracker綠DND-26的相應(yīng)的值是501和511nm。 另外，將試樣同時用DAPI染色（靶向DNA在細(xì)胞核中;激發(fā)在358nm，并且發(fā)射在461nm）。 注意沒有來自藍(lán)色熒光團(tuán)（DAPI）的信號，但明亮的綠色和桔紅色熒光通過在細(xì)胞骨架網(wǎng)絡(luò)的溶酶體和肌動蛋白絲表現(xiàn)出的存在。
圖2（D）展示了從海拉癌細(xì)胞轉(zhuǎn)染的EGFP-過氧化物酶體靶向信號1（PTS1）的融合蛋白，并用的Alexa Fluor 546鬼筆環(huán)肽的培養(yǎng)的熒光發(fā)射。 這些熒光探針靶向過氧化物酶體和細(xì)胞骨架肌動蛋白絲的網(wǎng)絡(luò)，分別。 *大吸收的EGFP-PTS1嵌合體是488nm，并且*大發(fā)射發(fā)生在507nm，而對于將Alexa Fluor 546的相應(yīng)的值是556和573nm。 另外，將試樣同時用Hoechst 33258（靶向于細(xì)胞核中的DNA;藍(lán)色發(fā)光）。 注意沒有來自藍(lán)色熒光信號，但明亮的橙紅色熒光的細(xì)胞骨架肌動蛋白絲，并從在細(xì)胞質(zhì)中過氧化物酶體的強(qiáng)烈綠色發(fā)射表現(xiàn)。
兔肺組織染色的肌動蛋白絲和糖蛋白的Alexa Fluor 546鬼筆環(huán)肽和Oregon Green488麥胚凝集素的薄膜部，分別示于圖2（e）所示。 *大吸收的Alexa Fluor 546的是556nm，并且*大發(fā)射發(fā)生在573nm，而對于Oregon Green488中的相應(yīng)值是496和524nm。 另外，將試樣同時用DAPI染色（在細(xì)胞核靶向DNA;藍(lán)色發(fā)光）。 注意沒有來自藍(lán)色熒光信號，但明亮的橙紅色熒光絲狀肌動蛋白，并從在組織切片的細(xì)胞質(zhì)和膜糖蛋白成分的綠色發(fā)光發(fā)揮。
由薄苜蓿的部分自發(fā)熒光發(fā)射強(qiáng)度（ 紫花苜蓿 ）的根組織中演示了圖2（f）所示。 在植物組織中的內(nèi)源性的自發(fā)熒光產(chǎn)生于各種生物分子，包括木質(zhì)素，葉綠素，β-胡蘿卜素，葉黃素和。 在藍(lán)色和綠色的激發(fā)區(qū)域，葉綠素具有吸收帶，具有高消光系數(shù)，并產(chǎn)生一個顯著量熒光在與450和550nm之間的波長激發(fā)。 對于以上說明的苜蓿根組織，注意自發(fā)熒光發(fā)射強(qiáng)度中的綠色和紅色光譜區(qū)域的存在，這是尼康FITC-Texas Red熒光激發(fā)塊組合的特性。