尼康顯微鏡綠色激發(fā)塊G-2E/C(帶通)

2020-09-03 14:09:08

紫外,可見和近紅外透射為尼康的G-2E / C過濾組合光譜圖在圖1的下方示出該濾波器組是兩個在Nikon綠色激發(fā)系列,它采用一個帶通發(fā)射(阻擋)濾波器1代替長通版本,并且旨在限制從熒光團(tuán)發(fā)射的量,組合優(yōu)化的頻帶之外的干擾。 60納米的發(fā)射窗口(590-650納米)是結(jié)合了介質(zhì)25納米激發(fā)通帶(528-553納米),以允許有選擇性的激勵和檢測在多個標(biāo)記實驗中使用的具體流行熒光團(tuán)。對G-2E / C過濾組合配有一個565納米(截止波長)長通二色鏡。

奧林巴斯顯微鏡

綠色激發(fā)濾塊G-2E / C規(guī)格:

  • 激發(fā)波長篩選:528-553納米(帶通,540 CWL)

  • 雙色鏡截止波長:565納米(長通,LP)

  • 屏障過濾波長:590-650納米(帶通,620 CWL)

G-2E / C濾波器組合與流行的熒光探針,如四甲異硫氰酸酯(TRITC)進(jìn)行了優(yōu)化,Cy3的,和DII,當(dāng)單獨(dú)或多重標(biāo)記技術(shù)被用于他們,并且還建議與紅色熒光蛋白的使用( 紅色熒光蛋白 )。帶通發(fā)射濾波器功能,以減少或消除從熒光團(tuán)發(fā)射的深紅色或近紅外光譜區(qū)的干擾。相比,可以在這些應(yīng)用(如Cy3的集合)中使用的一些其它濾波器組合,所述的G-2E / C組合產(chǎn)生視覺上更紅的圖像,由于發(fā)射的帶通(590納米)的相對高的低波長的限制,不包括大部分的黃色信號。 更高波長帶通的附加效果是降低了羅丹明類熒光成像時采集到的信號的總水平。吖啶紅,Alexa的熒光劑(546,555,和568),茜素紅,BODIPY探頭,鈣橙,Cy3的,DiI標(biāo)記,DiIC16,DiIC18,溴化乙錠,NeuroTrace:學(xué)習(xí)以下熒光團(tuán)時,G-2E / C套推薦六百一十五分之五百三,碘化丙啶,派洛寧B,RedoxSensor紅CC-1,羅丹明衍生物,塞夫龍河艷紅和TRITC。 在圖2中呈現(xiàn)的圖像表明具有多種針對不同細(xì)胞內(nèi)位置吸收綠光的熒光探針的這種過濾器組合的性能。

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一對女兒鼠袋鼠(PTK2)上皮細(xì)胞,示于圖2(a)中,分別為在那些在培養(yǎng)被免疫熒光標(biāo)記的同隨后綴合的山羊抗小鼠Fab片段初級抗牛的α-微管蛋白的小鼠單克隆抗體到的Alexa Fluor 546的吸收*大值的Alexa Fluor 546的是556納米,并且*大發(fā)射發(fā)生在573納米(在可見光光譜的黃色區(qū)域)。需要注意的是在整個細(xì)胞質(zhì)中延伸的細(xì)胞內(nèi)微管網(wǎng)絡(luò)的突出黃橙色染色。奧林巴斯顯微鏡

呈現(xiàn)在圖2(b)是從沾滿MitoTracker紅CMXRos,它的目標(biāo)細(xì)胞內(nèi)的線粒體的網(wǎng)絡(luò)牛肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)的熒光發(fā)射強(qiáng)度。*大吸收MitoTracker紅CMXRos的是579納米,并且*大發(fā)射發(fā)生在599納米。另外,將試樣同時用DAPI染色(在細(xì)胞核靶向DNA;藍(lán)色發(fā)光)和BODIPY FL-phallacidin(靶向肌動蛋白;綠色發(fā)光)。注意沒有信號從藍(lán)色(DAPI)和綠(BODIPY)熒光團(tuán),但明亮的橙紅色熒光被管狀線粒體發(fā)揮。

由薄小鼠腎臟的部分沾上多個(3)的熒光團(tuán)的熒光發(fā)射強(qiáng)度被證明在如圖2(c)。在組織切片細(xì)胞核靶向與核酸探針的DAPI,當(dāng)在細(xì)胞培養(yǎng)物和組織切片結(jié)合到DNA,其具有*大激發(fā)在358納米,并且具有發(fā)射*大值在461納米。 另外,低溫恒溫器部也同時沾上的Alexa Fluor 488麥胚凝集素(腎小球和曲小管)和Alexa Fluor 568鬼筆環(huán)肽(絲狀肌動蛋白和刷狀緣)。注意沒有信號的同時從藍(lán)色(DAPI)和綠(的Alexa Fluor 488)探針,但強(qiáng)烈的橙紅色熒光因的Alexa Fluor 568中的肌動蛋白和刷狀緣的網(wǎng)絡(luò)的存在。

是HeLa細(xì)胞即人免疫熒光標(biāo)記的同隨后綴合的Alexa Fluor 546山羊抗-小鼠Fab片段初級抗組蛋白(鍋)的小鼠單克隆抗體,圖2(D)中示出。 *抗體,從HeLa細(xì)胞的純化核級分生產(chǎn),特異性結(jié)合的抗原決定簇,其存在于所有五個組蛋白(H1,H2A,H2B,H3和H4)。 相同的探針(的Alexa Fluor 546,但共軛毒傘素到)被用來從非洲綠猴腎細(xì)胞(COS-1)在圖2(E)標(biāo)記的細(xì)胞的肌動蛋白。該細(xì)胞系不顯示顯著的微絲通常見于許多上皮培養(yǎng)物,如印度麂,HeLa細(xì)胞,和PTK2,而是形成小的原纖維具有更光滑的外觀。

從棕櫚樹( 篦齒蘇鐵 )microsporophyll薄款自發(fā)熒光發(fā)光強(qiáng)度呈現(xiàn)在圖2(F)。 在植物組織中的內(nèi)源性的自發(fā)熒光產(chǎn)生于各種生物分子,包括葉綠素,β-胡蘿卜素,葉黃素和。在綠色激發(fā)區(qū)域,葉綠素具有吸收帶具有低消光系數(shù),但仍然產(chǎn)生熒光的檢測水平在550納米的發(fā)射波長和上述(綠色,黃色,橙色和紅色)。 為棕櫚樹組織,注意自發(fā)熒光發(fā)射強(qiáng)度中的橙色和紅色光譜區(qū)域的存在,這是強(qiáng)烈讓人想起暗視場圖像的。