奧林巴斯顯微鏡：萊因伯格照明系統(tǒng)的介紹

光學(xué)染色的一種形式，萊因伯格照明（Rheinberg Illumination），最初是展示皇家顯微學(xué)會(huì)和Quekett的俱樂部（英格蘭）在一百多年前由英國(guó)顯微鏡朱利葉斯萊因伯格。這種技術(shù)是一個(gè)顯著的變化，從低到中等功率暗場(chǎng)照明使用彩色明膠或玻璃過濾器提供豐富的標(biāo)本和背景顏色。

可以的萊因伯格技術(shù)相比更熟悉的暗場(chǎng)照明。在暗視野顯微鏡，臺(tái)下聚光器配置，使來自燈的光的光線，通過聚光鏡，將試樣通過只在很斜的角度。遍歷聚光鏡的光錐的中心區(qū)域是閉塞裝置，不透光的光闌直徑足夠大，以防止光線直接進(jìn)入顯微鏡物鏡。在更復(fù)雜的暗場(chǎng)聚光鏡 - 拋物面形，心形，卡塞格林或Leuchtbild - 閉塞的斜光線直射光的利用率只達(dá)到使用專門設(shè)計(jì)的鏡面。

在暗場(chǎng)照明，選擇的物鏡的數(shù)值孔徑（通過一個(gè)物鏡的的光圈或漏斗停止或減少），所以，從聚光鏡的光不能直接進(jìn)入物鏡。唯一的光線，并進(jìn)入物鏡的光的反射，折射或衍射的試樣時(shí)，從聚光鏡的“一擊”試樣的傾斜射線。試樣，然后出現(xiàn)明亮否則黑場(chǎng)，故名暗場(chǎng)照明。與之形成鮮明對(duì)比的黑場(chǎng)明亮的物體上增加已經(jīng)解決的細(xì)節(jié)的可視性。暗視野聚光鏡可以在圖1中的插圖來近似取代的不透光的光闌時(shí)，綠色過濾器的中心，除去紅色斜光濾波器，使未經(jīng)過濾的白光通過。

位萊因伯格照明（圖1中示出），這是關(guān)系到暗視野中，數(shù)種形狀的過濾器使用。斜或外光線通過一個(gè)開闊的明視場(chǎng)聚光鏡通過一個(gè)環(huán)形（面包圈狀）濾波器中的一種或多種顏色（顯示在圖1和圖2中的環(huán)形過濾器的紅色濾色器）;中央光線的光線通過另一點(diǎn)狀的過濾器裝配到圓形開口的環(huán)形過濾器，如在圖2中所示的幾種組合。我們的物鏡是在全開光圈。在這種特定的情況下，試樣將顯示為綠色背景上（圖2（A）），黃藍(lán)色背景上（圖2（b）），或紅色背景上的綠色（圖2（c）是紅色） 。

制備用萊因伯格濾波器，或制造的，透明的，環(huán)形的，如圖3中所示的中央有圓形開口的色環(huán)的形式。在這些過濾器的商業(yè)化版本中，透明色的斑點(diǎn)或“中央過濾器”附帶的一套緊貼到開口的圓環(huán)（圖4）。中央過濾器的直徑的通過增加從外圈（圖4（交流）），單獨(dú)的過濾器的窄的黑環(huán)的尺寸，可以是多種多樣的（背景照明強(qiáng)度調(diào)制）。有效的組合，包括：紅環(huán)，紫羅蘭中央過濾器;橙黃色環(huán)，藍(lán)色中央過濾器，等等。其他直觀有效的圖像是由用有顏色的中央過濾器使用一個(gè)明確的未著色環(huán)。例如，一個(gè)紅色的中央過濾器會(huì)產(chǎn)生一個(gè)明確的環(huán)紅色背景上的白色或無色的圖像。

實(shí)際上，外圈“變成了”檢體的顏色和中央過濾器“變成了”背景顏色。也可以在外圈分為交替扇區(qū)的色彩，如在圖5中示出。部門的過濾器是特別有效的防翹曲的布料，晶面，硅藻，木節(jié)的長(zhǎng)度，寬度尺寸在將顯示在對(duì)比色的研究。

多年來，一些顯微鏡制造商在彩色凝膠出售萊因伯格過濾（類似到柯達(dá)雷登過濾），預(yù)切，以適應(yīng)他們的顯微鏡臺(tái)下過濾環(huán)。圓環(huán)的外徑為31-35毫米，中央過濾器，通常使用具有10倍- 0.25 NA物鏡的直徑為15-18毫米。在實(shí)驗(yàn)室中使用柯達(dá)雷登過濾器或彩色過濾器被廣泛使用在科學(xué)供應(yīng) 的房子和光學(xué)元件分銷商，這些過濾器也可以很容易制作。明膠濾鏡可以通過切割中央過濾用軟木塞螟適當(dāng)?shù)闹睆?，圓環(huán)，可以制備通過仔細(xì)地在濾紙上畫一個(gè)圓圈，用一把剪刀切割出來。在我們的實(shí)驗(yàn)室，支持機(jī)械師構(gòu)建一個(gè)的銅壓鑄削減環(huán)形濾波器的圓直徑相同我們?nèi)R因伯格過濾器支架。該模具可以迅速從醋酸或明膠彩色濾光片張郵票非常流暢界?？汕懈畹沫h(huán)形濾波器的中心具有相同的軟木螟用于制備中央過濾。

有時(shí)，它是困難的，提供了堅(jiān)實(shí)的環(huán)狀的過濾器殼體內(nèi)的中央過濾時(shí)，這些都是非常薄的醋酸鹽或明膠濾鏡。在這種情況下，你可以只是磁帶的中心環(huán)形濾波器雙面膠帶中央過濾過，但請(qǐng)記住，中央過濾器和環(huán)形濾波器的色彩會(huì)增加，所以使用一個(gè)非常黑暗的中央過濾器過濾器。中央過濾器，在一般情況下，應(yīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)比環(huán)形濾波器暗，允許標(biāo)本突出的背景形成鮮明對(duì)比的是。我們經(jīng)常放置兩個(gè)或三個(gè)相同顏色的中央過濾器堆棧中的，調(diào)整光的透射率，通過中央過濾件。萊因伯格過濾器還可以用玻璃過濾器，這是很方便的與這些過濾器的外殼時(shí)，臺(tái)下聚光器安裝。在這種情況下，最好是簡(jiǎn)單的磁帶到玻璃過濾器的中心的中央過濾。對(duì)于那些有興趣在自己的過濾器，一個(gè)更完整的討論是在李約瑟的實(shí)踐使用的顯微鏡，我們的參考書目中列出。

我們比較了明、暗場(chǎng)，萊因伯格照明技術(shù)，使用的鹿蜱（蜱dammini），如圖6的顯微照片。第一個(gè)顯微照片（a）表示的在光照下的滴答聲。圖像的明暗對(duì)比，很多細(xì)節(jié)是很難解決的。圖6（b）示出相同的暗場(chǎng)照明下的滴答聲，存在許多虱子的功能，更高的對(duì)比度和細(xì)節(jié)是顯而易見的。虱子使用藍(lán)色的中央濾波器和一個(gè)黃色的圓環(huán)（參見圖2（b）條），導(dǎo)致增加對(duì)比度的效果，類似于暗視野萊因伯格照明（圖圖6（c）），但是，具有令人愉快的藍(lán)色背景。在這個(gè)例子中，暗場(chǎng)和萊因伯格的照明技術(shù)，產(chǎn)生顯著的更好的顯微照片比明場(chǎng)。

在20世紀(jì)30年代后期，卡爾蔡司制造的一種特殊的聚光鏡，Mikropolychromar，設(shè)計(jì)，生產(chǎn)美麗萊因伯格圖像。這聚光鏡生產(chǎn)出來的長(zhǎng)，現(xiàn)在幾乎用不上，但它包括了齊明聚光下有三個(gè)獨(dú)立控制的隔膜。最外層的隔膜控制該字段的直徑，并且兩個(gè)較小的隔膜控制盤中央的光通過。各種顏色的環(huán)形透明環(huán)集的一部分。伴隨著這些組是一個(gè)透明的玻璃中央的磁盤漂亮地嵌合到環(huán)形圈的中央開口。這種巧妙的聚光鏡的作者之一（M.阿布拉莫維茨）已被用于在不同的放大倍率，其中一些已經(jīng)出現(xiàn)在出版物全方位，時(shí)代生活，“科學(xué)美國(guó)人”，以及國(guó)家野生動(dòng)物保護(hù)產(chǎn)生引人注目的顯微照片。

照明萊因伯格是適合物鏡，從2倍到100倍不等。然而，為了清楚地分開的內(nèi)和外的顏色，不透明的金屬或紙環(huán)應(yīng)放在圍繞該中心的過濾器。例如，可能具有的不透明環(huán)的外徑為10倍的物鏡為15-18毫米，和22毫米的外徑可能會(huì)對(duì)最好為60倍的油浸物鏡。這是一個(gè)很好的主意，嘗試使用類似的中央過濾器如圖4所示，以達(dá)到最佳的結(jié)果與萊因伯格照明。

為了研究纖維，原蟲，紡織品，昆蟲，木節(jié)，水晶，或其他未染色的低反差的主體，顯微鏡應(yīng)考慮加入萊因伯格照明庫對(duì)比度技術(shù)。這將是可以查看和照片標(biāo)本產(chǎn)生視覺增強(qiáng)的圖像，以及外型美觀。

從作者的最后一個(gè)注意事項(xiàng)：盡量顯微鏡制造商和/或獨(dú)立配件制造商，他們生產(chǎn)萊因伯格的聚光鏡和過濾器使用顯微鏡。必要的組件將非常廉價(jià)的生產(chǎn)，將極大地幫助顯微鏡顯微鏡照明萊因伯格